Rouge de Ruthénium (ML29)
1. NATURE DU REACTIF :
Ce colorant est le sesquichlorure de ruthénium ammoniacal. Il a été
découvert par JOLY. Il est soluble dans l’eau ou dans une solution aqueuse d’alun à 10 %, mais non
dans l’alcool et la glycérine. La coloration résiste à l’alcool absolu, mais non aux acides minéraux...
2. PREPARATION :
Il se prépare en solution de 0,1 à 1 % dans l'eau bidistillée, avec 5
ou 10 % d'alun de potassium ; la solution aqueuse simple ne se conserve pas et il faut alors travailler
extemporanément.
Eau bidistillée : |
100 ml |
rouge de ruthénium : |
0,5 g |
alun de potassium : |
5 g |
3. UTILISATION :
Il colore seulement les éléments basophiles et donne d’excellents résultats en combinaison avec le bleu
de méthylène aluné :
- fixer à l’alcool
- placer la coupe 10 minutes dans le bleu de méthylène
- laver à l’eau
- placer 10 minutes dans le Rouge de Ruthénium
L’addition d’un peu d’acide acétique à la solution donne une très
belle coloration nucléaire.
En histologie végétale, ce colorant donne des couleurs variées
dans les éléments lignifiés (liège en vert – bois en bleu – parenchyme en rose – sclérenchyme en
violet). Il met en évidence en les colorant, les matières pectiques qui se trouvent dans les cellules
végétales.
En cytologie animale, c’est un excellent colorant des tissus tendineux.
Il présente les mêmes possibilités que le bleu coton lactophénol, pour l’étude des asques, avec des
résultats différents selon l’espèce étudiée coloration du cytoplasme et mise en évidence de la nasse
apicale chez les Loculomycetideae).
Robert Kühner le recommande particulièrement pour mettre en évidence les granulations carminophiles
(ou sidérophiles) des basides de Lyophylleae. Il a en outre l’avantage d’être plus facile d’emploi que
le carmin acétique ferrique.
- Traiter les coupes durant 10 à 20 secondes (maximum) dans une goutte du Rouge de Ruthénium
préparé comme ci-dessus, additionnée de 5 gouttes d’eau bidistillée (soit du colorant à 0,1 %).
Alain GERAULT : « le carmin en milieu acétique n'est pas le meilleur réactif du fer !
La fixation du fer (ou d'autres ions) sur des polymères est très dépendante de l'état des tissus et il
est bien évident qu'un début de dessiccation peut perturber la réaction de capture des ions de métaux
dans les "mailles" de ce polymère. Les histologistes ont partiellement résolu le problème en utilisant
le rouge de ruthénium car une seule réaction suffit ; le complexe rouge de ruthénium, étant comme son
nom l'indique rouge, on peut voir directement après action d'une solution du réactif puis rinçage s'il
y a eu fixation du ruthénium (même propriétés physico-chimiques que le fer dans ce cas). L'inconvénient
de la fixation du réactif existe toujours mais on a éliminé l'action du carmin acétique et des
manipulations toujours aléatoires. L'avantage principal est que les vapeurs d'acide acétique ne
viennent plus menacer de détériorer l'optique des microscopes, particulièrement l'optique
apochromatique, hors de prix… »
4. DANGERS :
En solution, il est plus ou moins toxique per os (par voie orale) et
de manière moindre par contact (laver abondamment dans ce cas). Il tache facilement la peau et les
vêtements.
5. CONSERVATION :
1 à 2 ans maximum ; la solution la plus simple consiste à le tester de temps en temps !

Créateur du projet : Didier
BAAR (
U)
Auteur de la fiche technique : Marcel
LECOMTE
Responsable : Marcel
LECOMTE (Cercle Mycologique de Namur & Cercle des M.L.B.)
Collaborateurs : Philippe
DUFOUR (Cercle Mycologique de Namur) - Roland
HANON (Cercle des M.L.B.)
Cercle des Mycologues du Luxembourg belge asbl (M.L.B.), Président : Paul
PIROT, rue des Peupliers, 10, B-6840 NEUFCHATEAU
Pour vos commandes : voir la feuille du Catalogue